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全血RNA提取
原理紅細胞裂解液選擇性裂解紅細胞,然后獨特的裂解液/β-巰基乙醇迅速裂解白細胞和滅活細胞RNA酶,然后用乙醇調節結合條件后,RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離
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光活化的核苷酸類似物介導的RNA-蛋白的交聯實驗
原理光化學交聯技術是研究核搪核蛋內復合物中 RNA 與蛋白的相互作用的有效手段。 其基本原理是未經任何化學修飾的 RNA -蛋白天然復合物在短波長紫外線(254
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采用RNA聚合酶Ⅲ啟動子表達siRNA分子
原理因為哺乳動物細胞不具備低等真核生物細胞所具有的擴增 RNAi 信號的機制,因此人工合成或體外轉錄的 siRNA 分子在細胞內的作用是瞬時性的,不適合用于進行
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天然RNA文庫篩選與蛋白特異性結合的RNA序列實驗
原理細胞中,蛋白質與 RNA 結合參與多種生理調控和發育過程。在 mRNA 的加帽,多聚腺苷酸化,剪切,核外運,翻譯起始及降解等過程中都存在著蛋白質與 RNA
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采用PACE分析RNA-肽相互作用實驗
原理聚丙烯酰胺共電泳(poiyacrylamide coelectrophuresis,PACE ) 檢測是相對較晚發展起來的定量分析蛋白質、肽與 DNA 或
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RNA足跡和修飾干擾分析實驗
原理RNA 足跡和修飾干擾分析(RNA footprinting and modification interference analysis)是用來研究 RN
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硝酸纖維素濾膜結合實驗確定RNA-蛋白質解離常數實驗
原理利用硝酸纖維素濾膜結合可以測定蛋白與 DNA、RNA 間的結合,該方法的基礎在于大多數蛋白可以與硝酸纖維素濾膜結合,如果蛋白質和核酸結合,那么該復合物也可以
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熒光RNA隨機引物觸發的聚合酶鏈反應實驗
材料與儀器步驟##一、 從組織和培養細胞中分離RNA1.TRIzol試 劑(Invitrogen)。該試劑含有苯酚和硫氰酸鹽化合物,操作時應穿實驗服,戴手套,存
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16S RNA靶向變性梯度凝膠電泳指紋 圖譜分析微生物菌群實驗
材料與儀器步驟疏水面的水將滑落)。5.用滾筒固定膠貼后移去紙保護層。6.用紙巾輕輕吸干膠貼。7.用 9 6 % 乙醇清洗分隔條,并放于膠貼的左右兩側。8.將小玻
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用酸性酚-硫氰酸胍-氯仿提取法純化組織和細胞中的 RNA
原理在提取過程的第一階段細胞的 RNA 酶應盡快滅活。一旦內源的 RNA 酶被破壞,RNA 受損的可能就大大降低,而純化的過程就可以按合適的速度進行。材料與儀器
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核糖核酸酶保護(用核糖核酸酶和放射性標記的RNA探針對RNA作圖)
原理核糖核酸酶保護分析用于度量特異性 mRNA 的豐度以及為它們的拓撲異構特征作圖。這種方法包括測試 RNA 與互補的放射標記的 RNA 探針(核糖探針)雜交,
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用一步法從細胞和組織中同時制備DNA、RNA和蛋白質
原理同 Chomczynski 和 Sacchi 兩人于 1987 年報道的 RNA 快速提取法一樣,這種方法包括用含異硫氰酸胍和酚的一種單相液來裂解細胞。加入
蛋白質 DNA RNA -
變性RNA在膜上的轉移和固定
原理多數情況下,為檢測特定的靶 mRNA,需先將 RNA 通過瓊脂糖電泳分離后,再從膠上轉移到二維支持物上,(通常用尼龍膜),再與持異的標記探針雜交。正如在 N
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用S1核酸酶對RNA作圖
原理三種不同的核酸酶——S1 核酸酶、RNA 酶、外切核酸酶Ⅶ被用來進行 RNA 定量,確定內含子位置,以及用來鑒定在克隆的 DNA 模板上的 mRNA 的 5
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根據大小分離RNA:乙二醛化RNA的瓊脂糖凝膠電泳
原理這個方法將乙二醛變性和瓊脂糖凝膠電泳結合了起來(從 McMaster 和 Carmichael (1977), Thomas(1983) 的方法修改而來)。
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