PCR
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PCR新手必看！細節制勝
嘿，PCR新手們！剛開始做PCR實驗可能會有點手忙腳亂，但別擔心，我來給你們分享一些小貼士，幫你們順利上手。實驗設計 在開始實驗之前，一定要仔細設計你的實驗方案
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定點誘變實驗（利用PCR引物點突變）
材料與儀器DNADNA聚合酶 klenow 限制性內切酶水浴鍋 離心機 培養箱步驟1. 制備模板（見基本方案，步驟1和2） 2. 合成和純化寡核苷酸引物并對
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循環測序：利用 PCR 和引物末端標記進行雙脫氧測序實驗
材料與儀器ddNTP 延伸 終止混合物 酶及其緩沖液 AmpliTaq CS 或其他無外切酶活性的 DNA 聚合酶 循環測序緩沖液 熱穩定的 DNA 聚合酶 核
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利用大引物 PCR 在同一試管中進行高效快速定點誘變實驗
材料與儀器擴增緩沖液 含有四種 dNTP 的混合溶液 熱穩定 DNA 聚合酶 瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠 正向和反向內引物 誘變引物 模板 DNA帶屏障裝置的自
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通過PCR擴增在擴增DNA產物末端引入限制性核酸內切酶酶切位點
原理材料與儀器噬菌體 T4 DNA 連接酶 限制性內切核酸酶 靶 DNA氯仿 EDTA 乙醇 酚 氯仿 乙酸鈉 TE瓊脂糖凝膠 水浴箱步驟一、材料1. 緩沖液與
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應用 PCR 的遺傳工程
原理本方案（由德克薩斯大學西南醫學中心的 Andereson 提供）敘述在克隆化的哺乳動物 cDNA 的 5‘ 與 3‘ 端同時導入限制性內切核
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利用PCR分析酵母菌落
原理用 PCR 分析酵母菌落時，無需純化 DNA。本方案以單個酵母菌落的粗裂解液作為 PCR 擴增的模板，來確定酵母中是否攜帶目的 DNA 序列。 材料與儀器T
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長距離PCR
原理在標準 PCR 反應條件下，PCR 擴增 DNA 片段的長度一般為 1~2 kb，這種擴增能力對許許多多常規的 DNA 分子操作技術要求來說是已經足夠了（如
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差異顯示PCR
材料與儀器反轉錄酶 熱穩定 DNA 聚合酶 錨定 3‘-寡核苷酸引物 隨機 5‘-寡核苷酸引物 總 RNA 帶放射標記的 dATP擴增緩沖液 D
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利用PCR進行單一位點的體外基因定點突變
簡介利用 PCR 的引物設計靈活性．在擴增中直接引入突變。首先設計一對引物，引物l用于導入突變位點，引物 2 與引物 1 的 5‘-端鄰接、3‘
PCR 基因定點突變 -
高 GC 含量片段的 PCR 擴增實驗
材料與儀器甜菜堿 dNTP 溶液 二甲基亞砜 四甲基砜 Taq 酶和酶緩沖引物PCR 儀步驟一、材料1. 試劑甜菜堿（Sigma 公司）dNTP 溶液（含四種
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以硅膜為基礎純化 PCR 產物實驗方法
材料與儀器乙醇 PCR 樣品真空裝置 真空泵 真空廢物收集裝置 真空管 PCR 純化系統步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑乙醇，80%(75 ml/板；使用前
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建立一個實時 PCR 定量分析實驗
材料與儀器MgCl2 探針 HotStmMix 正向和反向擴增引物 模板 DNAPCR 儀 反應管、毛細管或 96 孔的微量滴定板步驟一、材料1. 緩沖液和溶液
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實時 PCR 實驗
材料與儀器PCR Super Mix-UDG ROX 染料 蒸餾水 反向引物 正向引物ABIPRISM7700 型號系列檢測系統步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和
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多重 PCR 擴增實驗
原理多重PCR（multiplex PCR），其反應原理，反應試劑和操作過程與一般PCR相同。一般PCR僅應用一對引物，通過PCR擴增產生一個核酸片段，主要用于
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