實時熒光定量 PCR（Quantitative Real-time PCR）是一項以 PCR 反應為基礎的 DNA 定量技術，通過對目標基因在擴增過程中產生的拷貝數進行實時的定量，從而達到對目的基因的定性和定量分析。現有兩種常用的方法對 PCR 產物進行熒光定量：一種是利用熒光染料與雙鏈 DNA 結合，通過熒光強度進行定量；另一種是利用攜帶了熒光報告基團的特異DNA 探針對目標基因進行定量。

一、利用熒光染料進行定量

一種最為常用的定量方法就是在 PCR 反應體系中加入熒光染料，此類熒光染料會與所有的雙鏈 DNA 結合，并產生熒光。游離的熒光分子不會產生熒光信號，只有與雙鏈 DNA 結合的熒光分子才會釋放熒光，隨著 DNA 拷貝數的增加，測得的熒光強度也會增強。