經典的商品化培養基有很多種，其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM 、 DMEM/F12 都是應用最廣泛的培養基。其他如：M199 、 IMDM 、 L15培養基等也用于某些細胞的培養。以下介紹10種常用的商品化細胞培養基以及常用的細胞完全培養基配置方法。

1、BME細胞培養基

基礎Eagle培養基（Basal Medium Eagle），1955年Eagle設計，BSS＋12種氨基酸＋谷氨酰胺＋8種維生素。簡單、便于添加，適于各種傳代細胞系和特殊研究用，在此基礎上改良的細胞培養基品種有MEM、DMEM、IMDM等。

2、MEM細胞培養基

又稱低限量Eagle培養基（Minimal Essential Medium），1959年在Eagle's基礎培養基（BME）上修改而來，刪去賴氨酸、生物素，氨基酸濃度增加，適合多種細胞單層生長，有可高壓滅菌品種，是一種最基本、試用范圍最廣的培養基，但因其營養成分所限，針對生產之特定細胞培養與表達時，并不一定是使用效果最佳或者最經濟的培養基。

3、DMEM細胞培養基

DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養基，由MEM培養基改良而來，起初是為小鼠成纖維細胞設計的。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調整為4500 mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了。

DMEM培養基是貼壁培養細胞優先選擇的一款培養基。根據葡萄糖含量的高低，DMEM培養基一般可以區分為高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)兩種。其中，高糖型DMEM培養基有利于細胞停泊于一個位置生長，適于生長較快、附著較困難的腫瘤細胞等。而做單抗細胞融合時，則一般會選用使用低糖型DMEM培養基。高糖型DMEM使細胞生長過快，反而不利于融合細胞的染色體穩定。

DMEM培養基的高糖與低糖有哪些區別？

• 用途不同：低糖DMEM用于養干細胞可防分化，高糖DMEM可以養大多數哺乳動物的細胞。
• 適用性不同：高糖DMEM 適于培養代謝旺盛的細胞，而低糖適于培養一般代謝水平的細胞。代謝活躍的細胞，如ES，低糖培養基不能提供足夠的碳源。
• 性質不同：低糖的酵母適合在7%以下的糖濃度中生存，而高糖的酵母適合在7%以上糖濃度中生存。
• DMEM高糖培養基P04-04550含穩定谷氨酰胺，含25mM Hepes，不含丙酮酸鈉，廣泛應用于支持哺乳動物細胞培養的廣譜培養基。相比于BME中增加了4倍的氨基酸和維生素含量。來源：用來培養未轉化過的老鼠和雞的細胞培養。有高糖（4.5g/l）、低糖(1g/l)和無糖等類型。
  

4、IMDM細胞培養基

Guilber 和Iscove將Dulbecco' Medium 改良為 Iscove's Medium，用于培養紅細胞和巨噬細胞前體。此種培養液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進小鼠B淋巴細胞，LPS刺激的B細胞，骨髓造血細胞，T細胞和淋巴瘤細胞的生長。IMDM為營養非常豐富的培養液，因此可以用于高密度細胞的快速增殖培養。

5、RPMI-1640細胞培養基

Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制，針對淋巴細胞培養設計，含BSS＋21種氨基酸＋維生素11種等。現也用于懸浮細胞培養，如哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞，雜交瘤細胞的培養，其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。

6、HamF10細胞培養基

1963年Ham設計，含微量元素，可在血清含量低時用，適用于克隆化培養。F10適用于倉鼠、人二倍體細胞，特適于羊水細胞培養。

7、DMEM/F12細胞培養基

Ham's F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的，現在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養。F12還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產物，這種培養基已應用于許多原代培養及更難養的細胞系的培養。由于營養成分豐富，且可以使用較少血清，故也常作為無血清培養基的基礎培養基。

8、M199細胞培養基

1950年Morgan等設計的具有確定化學成分的細胞培養液，即M-199。除BSS外，含有53種成分，為全面培養基，主要用于雞胚成纖維細胞培養。此培養液必須輔以血清才能支持長期培養。M-199可用于培養多種種屬來源的細胞，并能培養轉染的細胞。現廣泛用于病毒學、疫苗生產。

9、McCoy5A培養基

1959年MeCoy為肉瘤細胞設計，BSS＋40種成分。可支持多種（如骨髓、皮膚、肺和脾臟等）的原代移植物的生長，除適于一般的原代細胞培養外，主要用于作組織活檢培養、一些淋巴細胞培養以及一些難培養細胞的生長支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細胞、人淋巴細胞、HT-29、BHL-100等上皮細胞。

10、L15 細胞培養基

L-15培養液適用于快速增殖瘤細胞的培養，用于在CO2缺乏的情況下培養腫瘤細胞株。此培養液采用磷酸鹽緩沖體系，氨基酸組成進一步改良，并由半乳糖替代了葡萄糖。

至于選擇何種培養基并沒有一定的標準，有幾點建議可供參考：

(1)建立某種細胞株所用的培養基應該是培養這種細胞首選的培養基。可以查閱參考文獻，或在購買細胞株時咨詢。也可以在一些生物公司的網站上搜索，如Invitrogen網站上有一個Cell Line Database的工具，選擇你感興趣的細胞類型，它就會彈出推薦的培養基、血清和轉染試劑等，有時還有優化好的轉染步驟，很方便。

(2) 其它實驗室慣用的培養基不妨一試，許多培養基可以適合多種細胞。

(3) 根據細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養基。如小鼠細胞株多選RPMI1640 。

(4) 用多種培養基培養目的細胞，觀察其生長狀態，可以用生長曲線、集落形成率等指標判斷，根據實驗結果選擇最佳培養基，這是最客觀的方法，但比較繁瑣。

關于EDTA：

細胞培養液中是不可能含有EDTA的，EDTA會螯合Ca2+和Mg2+，而鈣鎂離子是細胞貼壁和正常生長所必須的。
而消化細胞用的胰酶中一般含有EDTA，目的是螯合掉培養基中的這兩個離子，防止鈣鎂離子抑制胰酶活性，以便胰酶將細胞消化下來。

細胞完全培養體系配置方法

細胞培養體系一般由以下四種（三種）組成：

添加劑和雙抗通常濃度為 100X（100 倍工作濃度）。血清的添加比例有 0%（不添加），1%（5mL）， 2%（10mL），5%（25mL），10%（50mL）幾種。【大多數實驗室使用的完全培養基配置方法為：450~500mlDMEM培養基+50mlFBS（胎牛血清）+5ml雙抗】

第一次使用時先將-20℃保存的添加劑、雙抗、FBS 轉移到 4℃溶解后，在滅菌后的百級潔凈等級環境中操 作，所使用的容器和移液耗材均需要進行過無菌處理。

首先將解凍的 FBS、添加劑和雙抗進行分裝，平均分裝成 5-10 份，留下本次配制所需要的量， 剩余的繼 續放回-20℃保存，之后按需取用融化后配制完全培養基，避免反復凍融。

建議用無菌的 50mL 離心管盛裝配置好的完全培養基。

配制方法：在每個 50mL 離心管中加入①500uL 添加劑、②500uL 雙抗、③50×血清百分比 mL 的胎牛血 清、④（50×（1-血清百分比）-1）mL 的基礎培養基。配制完成后蓋上蓋子，顛倒混勻備用。

例如：在血清比例為 5%的條件下，50mL 離心管中各組分的體積分別為：
基礎培養基：（50×（1-5%）-1）=46.5mL+添加劑：500uL +雙抗：500uL+血清：50×5%=2.5mL

配置好的培養基置于 4℃避光保存。由于添加劑中有很多重組蛋白，易發生降解，故配置好的完全培養基 有效期僅為 3-4 周，請盡快使用。因此建議每次配制 1-2 管（50-100mL），當然使用量大的情況下也可以 適量增加配置量。

P. S.：不建議客戶將全部的血清、雙抗、添加劑直接加入基礎培養中混勻使用，原因如下：
1. 500mL 的基礎培養基的體積較大，灌裝時體積波動很大，直接加入，無法準確地控制因子和血清的工作 濃度。

2. 配制好的培養基僅能在 4℃保存 3-4 周，如果期間沒用完，繼續使用會影響培養效果。如果是-20℃保存，可以延長保存時間，但是反復凍融也會影響完全培養基的效果。

3. 如果使用培養基時由于操作失誤導致污染，分裝能減少培養基的損失量。